引物设计原则

2026-11-12

什么是引物设计原则,一起来看看小编今天的分享吧。   1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp。   2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近。   3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳,5'到 3’的下降形状也有利于引物与模板的结合。   4、ΔG值(自由能)反应了引物与模板结合的强弱程度,3'端的ΔG值相对要低...

阅读更多

引物设计基本原则是什么

2026-10-29

1、首先引物与模板的序列要紧密互补。 2、其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构。 3、再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应即错配。 4、引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补...

阅读更多