酵母双杂交技术原理和步骤
酵母双杂交技术(Yeast Two-Hybrid)是一种用来研究蛋白质相互作用的实验技术。该技术利用酵母细胞的自身特性,使得两个蛋白质分别与介导转录激活的Gal4转录因子不同区域结合,从而激发酵母细胞内特定的报告基因(reporter gene)的表达。当两个蛋白质的结合能够激活报告基因的表达,则表明这两个蛋白质之间存在相互作用关系。 具体实验步骤如下: 1.构建酵母表达载体:将含有自身复制元件2μ、酵母转录起始序列、选择性筛选的标记基因等元件的酵母表达载体与感兴趣的蛋白质基因融合...